- 细胞生物学课程 - 视频引入:地外生命快速净化过程 - 吃瓜群众观点:长得快 - 生物背景学生观点:分裂速度快 - 细胞生物学学生观点:细胞周期各时相均短 - 细胞周期概念 - 定义:从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束的过程 - 分期:G1期、S期、G2期、M期 - 类比跑道 - 不同时相对应不同事件 - G1期:细胞生长与合成重建 - S期:基因组复制 - G2期:准备进入分裂 - M期:细胞分裂 - 细胞周期调控 - 影响因素:细胞来源、培养环境、外界环境 - 细胞周期过短可能导致癌变 - 细胞周期测定方法 - 细胞群体倍增时间测定法 - 粗略获得整体时间 - 缩时摄像法 - 准确测定M期时间 - 流式细胞术 - 无法区分G2期和M期 - 脉冲标记DNA复制和细胞分裂指数观察测定法 - 核心概念 - 脉冲标记DNA复制 - 使用放射性胸腺嘧啶标记S期DNA - 细胞分裂指数(PLM) - 标记有丝分裂细胞占比 - 细胞周期与时相关系 - 原理与步骤 - 脉冲标记后观察标记比例变化 - 计算各时期长度 - 应用范围 - 适用于简单、均匀运转的细胞群体 - 优缺点 - 优点:可测定总周期及各时期时长 - 缺点:放射性风险、对复杂细胞群体计算困难 - 思考问题 - 脉冲标记时间对曲线的影响 - 总结 - 回顾细胞周期基本概念 - 重点讲解脉冲标记法原理与应用