- 凯氏定氮法 - 应用范围 - 含氮有机药物分析 - 普米酮含量测定 - 蛋白质测定 - 食物(肉类、面粉、谷物等) - 饲料、土壤、肥料 - 合成药物 - 原理与操作 - 基本原理 - 分为三部分 - 消解 - 含氮有机物转化为硫酸氢铵和硫酸铵 - 氨蒸馏和吸收 - 加入氢氧化钠释放氨,硼酸吸收 - 测定 - 硫酸滴定测定氮含量 - 具体操作 - 消解步骤 - 试剂与作用 - 硫酸:氧化剂、碳化剂、分解剂 - 硫酸盐:提高沸点 - 氨化剂:加速反应 - 装置与方法 - 凯氏烧瓶,45度角放置 - 消解时间 - 至深绿色后继续加热30分钟 - 消解产物 - 含碳变二氧化碳,含氢变水,含氮变硫酸氢铵和硫酸铵 - 样品处理 - 特殊样品需加还原剂或辅助氧化剂 - 蒸馏步骤 - 加入氢氧化钠释放氨 - 冷凝装置吸收氨 - 滴定分析 - 硫酸滴定液测定氮含量 - 优缺点 - 优点 - 广泛用于蛋白质分析 - 操作简单 - 实验费用低 - 结果准确 - 缺点 - 测定总有机氮而非蛋白质氮 - 时间长,至少2小时 - 试剂具有腐蚀性 - 相关案例 - 三聚氰胺事件 - 凯氏定氮法无法区分蛋白质氮和非蛋白质氮 - 导致食品安全问题 - 思考题 - 普米酮滴定度计算 - 每毫升硫酸滴定液相当于10.91毫克普米酮