- DNA聚合酶的核心功能 - DNA复制依赖DNA聚合酶完成 - 核心酶的三维结构类似右手 - 新合成链与模板链接头位于掌心 - 模板链在指根处扭转,暴露合成位点 - 添加核苷酸机制 - 通过Watson-Crick配对决定是否添加dNTP - 配对正确时形成磷酸二酯键 - 配对错误时催化效率降低 - 区分dNTP与NTP - 分辨器氨基酸通过空间位阻排除NTP - 金属离子辅助稳定dNTP位置 - 手指部分固定碱基环以促进催化 - DNA聚合酶的种类与分工 - 原核细胞中发现5种DNA聚合酶 - DNA聚合酶1 - 主要用于单链缺口填充 - 具有外切酶活性 - DNA聚合酶3 - 主要负责DNA复制 - 核心酶构成“神奇手掌” - DNA聚合酶2、4、5参与DNA修复 - 真核细胞中发现15种DNA聚合酶 - DNA聚合酶α引物酶参与新链起始 - DNA聚合酶δ和ε参与延伸 - 多数参与DNA修复 - DNA聚合酶的校对与修复功能 - 出错概率约为千分之一到万分之一 - 错误核苷酸导致骨架扭曲 - 模板引物接头滑动至小鱼际部分 - 三撇到五撇方向外切酶水解错误核苷酸 - 恢复正常后重新回到活性中心继续合成 - DNA聚合酶的协同作用 - 复制叉上多种酶协同工作 - 滑动夹及其装配器协助核心酶高效运行 - 合成速度与效率 - 原核细胞每秒合成约500个核苷酸 - 真核细胞每秒合成约50个核苷酸