- 质粒载体
  - 上节课内容回顾
    - 载体功能
      - 运转外源基因进入宿主细胞
      - 提供外源基因的固执与整合能力
      - 外源基因表达的条件支持
    - 载体类型
      - 根据上节课分类总结
  - 质粒的基本概念
    - 定义
      - 独立于染色体进行自我复制的DNA分子
    - 特点
      - 非细菌生存必须
      - 可与细菌共存并提供保护功能
      - 分子量在低到中等范围
  - 质粒的基本性质
    - 自主复制性
      - 具备复制系统
      - 控制拷贝数的基因
      - 独立于细菌染色体DNA复制
    - 互融性
      - 同一复制系统的质粒不能共存
      - 不同复制系统的质粒可共存
    - 扩增性
      - 松弛型复制与严谨型复制
    - 可转移性
      - 在天然条件下自主完成转移
  - 人工构建质粒
    - 构建基础
      - 松弛型复制质粒
      - 严谨型复制质粒
    - 改造方法
      - 去除无用基因，接入有用基因
      - 增加或减少特定元件
      - 改变控制特性
      - 加入特殊基因元件
  - 实验室操作技术
    - 质粒提取方法
      - 简便解法
        - 使用SDS和蛋白酶去除杂质
        - 提取纯度高但过程繁琐
      - 废墟语法
        - 提取规模小但过程简单
    - 质粒克隆技术
      - 使用限制性内切酶处理DNA
      - 连接外源DNA与质粒DNA
      - 转化至宿主细胞
      - 筛选阳性菌落
    - 质粒筛选方法
      - 蓝白斑筛选
        - 插入序列未连接表现为蓝色菌落
        - 插入序列成功连接表现为白色菌落
  - 课程总结
    - 质粒特征
    - 质粒操作技术