- 植物病毒的危害 - 植物感染病毒后生活力降低 - 导致产量和品质下降 - 可能造成植株矮化甚至死亡 - 植物病毒的防治现状 - 全球已发现近七百种植物病毒 - 目前缺乏有效药物防治 - 脱毒是主要解决办法 - 常用脱毒方法 - 热处理法 - 组织培养脱毒法 - 其他脱毒法 - 组织培养脱毒法介绍 - 定义与原理 - 通过茎尖分生组织培养获得无病毒试管苗 - 病毒在植株体内分布不均匀,茎顶端病毒含量最低 - 影响因素 - 切取茎尖大小影响脱毒效果和成活率 - 组织培养脱毒法操作流程 - 制作培养基 - 使用MS培养基为基础 - 添加细胞分裂素、生长素、蔗糖等成分 - 配制母液并调节pH值至5.8 - 高压灭菌后冷却待用 - 材料选取与消毒 - 选择顶部芽段进行预处理 - 清洗后用酒精和升汞溶液消毒 - 无菌水冲洗多次确保清洁 - 茎尖剥离 - 在解剖镜下剥出生长点 - 切取0.3-0.4毫米大小的茎尖 - 迅速植入培养基中 - 培养条件 - 温度26-28摄氏度 - 光照强度2000勒克斯 - 每天保证14小时光照 - 总结与展望 - 重点讲解茎尖培养脱毒法原理与操作 - 后续课程将探讨继代繁殖与深耕培养